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簡要描述:PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞 上海復(fù)祥生物提供 ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和培養(yǎng)條件,上有細胞照片,歡迎各位老師咨詢!
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PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞
PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞
細胞株名稱:豬鼻甲黏膜成纖維細胞(PT-K75)
種屬:豬
組織來源:豬鼻
生長特性:成纖維細胞樣,貼壁生長
形態(tài)特征:上皮細胞
培養(yǎng)條件:
*培養(yǎng)基:DMEM培養(yǎng)基(GIBCO),90%;進口優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,雙抗,1%。
培養(yǎng)條件:37℃ carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞后,取出培養(yǎng)瓶在顯微鏡下觀察細胞生長情況。 (一)如果細胞未超過80%匯合度時,用75%酒精噴灑整個瓶身消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細胞已超過80%匯合度時,可根據(jù)情況進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)潤洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置37℃培養(yǎng)箱中1-3分鐘預(yù)熱,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻。 4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5ml培養(yǎng)基的新皿中或者培養(yǎng)瓶中。 5. 2-3天換液一次。
注意:收到細胞后將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫1-2小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。傳代后細胞應(yīng)該用新鮮的培養(yǎng)液,原瓶的培養(yǎng)液不能再使用。在運輸過程中可能會導(dǎo)致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。(收到細胞后3天內(nèi)發(fā)現(xiàn)細胞異常請及時拍照并聯(lián)系
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